蛋白質(zhì)的概述
更新時(shí)間:2021-07-01 點(diǎn)擊次數(shù):997
那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡(jiǎn)單介紹一下關(guān)于蛋白質(zhì)親和純化概述:
蛋白質(zhì)的分離純化是研究蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的重要手段,也是制備工業(yè)用酶、抗體、疫苗、基因重組等的唯yi途徑。蛋白純化的方法多種多樣。常用的有以下幾種方案:基于蛋白質(zhì)的溶解度不同設(shè)計(jì)的鹽析或等電點(diǎn)沉淀方法;基于蛋白質(zhì)分子量差異的透析與超濾或凝膠過(guò)濾方法;基于蛋白質(zhì)所帶電荷不同設(shè)計(jì)的等電聚焦電泳或離子交換層析方法;以及利用特異性配體與目的蛋白結(jié)合的親和層析法等等。相對(duì)核酸純化而言,不同蛋白質(zhì)的特性千差萬(wàn)別,摸索純化條件往往是一項(xiàng)艱難而繁復(fù)的工作。
親和層析是利用生物分子間的親和吸附和解離而設(shè)計(jì)的層析方法,具有操作簡(jiǎn)單、條件溫和、獲得的蛋白純度高等特點(diǎn),特別適合于活性蛋白質(zhì)的純化,并且對(duì)表達(dá)量低的活性蛋白也具有良好的分離效果。常用的親和層析基質(zhì)包括:專門針對(duì)抗體的蛋白A或蛋白G親和基質(zhì),針對(duì)生長(zhǎng)因子和核酸結(jié)合蛋白的肝素型親和基質(zhì),用于純化含有標(biāo)簽的融合蛋白親和基質(zhì),以及結(jié)合了特異性抗體的親和基質(zhì)等。隨著基因重組表達(dá)技術(shù)的廣泛應(yīng)用,將目的蛋白與親和純化標(biāo)簽進(jìn)行融合表達(dá),再通過(guò)親和層析法純化出目的蛋白,已成為實(shí)驗(yàn)室*常用的一項(xiàng)技術(shù)。
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