凝膠電泳常見(jiàn)問(wèn)題分析

要跑瓊脂糖凝膠電泳，5ng就能很清楚的跑出來(lái)是這樣嗎？能夠照相的清楚的條帶，至少需要多少量呢？參考見(jiàn)解：5ng已經(jīng)可以了，但是或許20ng50ng-200ng效果好，在此范圍內(nèi)呈線性。把210bp的pcr產(chǎn)物進(jìn)行酶切,得到190+20bp的兩個(gè)片段,請(qǐng)問(wèn)能用瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)酶切結(jié)果嗎?用多大濃度的膠和多大的電壓呢?參考見(jiàn)解：可以用瓊脂糖凝膠電泳分開(kāi),電壓不變,可用1.5%到2%的膠,20bp得片斷不一定能看得到,所以應(yīng)用未酶切的PCR片斷作對(duì)照.瓊脂糖濃度（W/V）大小范圍...

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滴定管的使用方法

一、滴定管的構(gòu)造及其準(zhǔn)確度（1）構(gòu)造滴定管是容量分析中zui基本的測(cè)量?jī)x器，它是由具有準(zhǔn)確刻度的細(xì)長(zhǎng)玻璃管及開(kāi)關(guān)組成。滴定管是容量分析中zui基本的測(cè)量?jī)x器，是在滴定時(shí)用來(lái)測(cè)定自管內(nèi)流出溶液的體積。（2）準(zhǔn)確度常量分析用的滴定管為50ml或25ml，刻度小至0.1ml，讀數(shù)可估計(jì)到0.01ml，一般有±0.02ml的讀數(shù)誤差，所以每次滴定所用溶液體積在20ml以上，若滴定所用體積過(guò)小，則滴定管刻度讀數(shù)誤差影響增大。二、滴定管的種類(lèi)（1）酸式滴定管（玻塞滴定管）酸...

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實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)及在我國(guó)衛(wèi)生應(yīng)急中的應(yīng)用

實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)（Real-timequantitativePolymeraseChainReaction簡(jiǎn)稱RealTimePCR，如果用于RNA檢測(cè)，這被稱為逆轉(zhuǎn)錄實(shí)時(shí)PCR即Real-timeRT-PCR）是實(shí)時(shí)PCR法，它是指對(duì)DNA或經(jīng)過(guò)反轉(zhuǎn)入（RT-PCR）的RNA通過(guò)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)并實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)DNA的放大過(guò)程，在擴(kuò)增的指數(shù)增長(zhǎng)期就測(cè)量擴(kuò)增產(chǎn)物，因?yàn)閿U(kuò)增指數(shù)增長(zhǎng)期測(cè)量值與特異DNA（RNA）起始量存在相關(guān)性，從而實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)。RealTimePCR的基本目標(biāo)是...

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多肽合成的研究及應(yīng)用現(xiàn)狀

1，多肽合成的研究歷史多肽合成研究已經(jīng)走過(guò)了一百多年的光輝歷程，1902年，EmilFischer首先開(kāi)始關(guān)注多肽合成，由于當(dāng)時(shí)在多肽合成方面的知識(shí)太少，進(jìn)展也相當(dāng)緩慢，直到1932年，MaxBergmann等人開(kāi)始使用芐氧羰基（Z）來(lái)保護(hù)α-氨基，多肽合成才開(kāi)始有了一定的發(fā)展。到了20世紀(jì)50年代，有機(jī)化學(xué)家們合成了大量的生物活性多肽，包括催產(chǎn)素，胰島素等，同時(shí)在多肽合成方法以及氨基酸保護(hù)基上面也取得了不少成績(jī)，這為后來(lái)的固相合成方法的出現(xiàn)提供了實(shí)驗(yàn)和理論基礎(chǔ)。1963年，...

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凝膠電泳實(shí)驗(yàn)的一些注意事項(xiàng)

影響電泳分離的主要因素：1.待分離生物大分子的性質(zhì)：待分離生物大分子所帶的電荷、分子大小和性質(zhì)都會(huì)對(duì)電泳有明顯影響。一般來(lái)說(shuō)，子帶的電荷量越大、直徑越小、形狀越接近球形，則其電泳遷移速度越快。2.緩沖液的性質(zhì)：緩沖液的pH值會(huì)影響待分離生物大分子的解離程度，從而對(duì)其帶電性質(zhì)產(chǎn)生影響，溶液pH值距離其等電點(diǎn)愈遠(yuǎn)，其所帶凈電荷量就越大，電泳的速度也就越大，尤其對(duì)于蛋白質(zhì)等兩性分子，緩沖液pH還會(huì)影響到其電泳方向，當(dāng)緩沖液pH大于蛋白質(zhì)分子的等電點(diǎn)，蛋白質(zhì)分子帶負(fù)電荷，其電泳的方向...

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