瓊脂糖膠和PAGE膠制備方法

一、瓊脂糖凝膠的特點天然瓊脂（agar）是一種多聚糖，主要由瓊脂糖（agarose，約占80％）及瓊脂膠（agaropectin）組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構(gòu)成的中性物質(zhì)，不帶電荷，而瓊脂膠是一種含硫酸根和羧基的強(qiáng)酸性多糖，由于這些基團(tuán)帶有電荷，在電場作用下能產(chǎn)生較強(qiáng)的電滲現(xiàn)象，加之硫酸根可與某些蛋白質(zhì)作用而影響電泳速度及分離效果。因此，目前多用瓊脂糖為電泳支持物進(jìn)行平板電泳，其優(yōu)點如下。（1）瓊脂糖凝膠電泳操作簡單，電泳速度快，樣品不需事先處理就可以進(jìn)行電泳。（2）瓊...

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分子生物學(xué)實驗基礎(chǔ)知識

分子生物學(xué)是在生物化學(xué)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的，以研究核酸和蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)、功能等生命本質(zhì)的學(xué)科，在核酸、蛋白質(zhì)分子水平研究發(fā)病、診斷、治療和預(yù)后的機(jī)制。其中基因工程（基因技術(shù)，基因重組）是目前分子生物學(xué)研究熱點，這些技術(shù)可以改造或擴(kuò)增基因和基因產(chǎn)物，使微量的研究對象達(dá)到分析水平，是研究基因調(diào)控和表達(dá)的方法，也是分子水平研究疾病發(fā)生機(jī)制、基因診斷和基因治療的方法。轉(zhuǎn)化（transformation）、轉(zhuǎn)染、轉(zhuǎn)導(dǎo)、轉(zhuǎn)位等是自然界基因重組存在的方式，也是人工基因重組常采用的手段?；蛑亟M的目...

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液相色譜儀常見故障及解決方法

1、氣泡溢出流動相內(nèi)有氣泡，關(guān)閉泵，打開泄壓閥，打開purg鍵，清洗脫氣，氣泡不斷從過濾器冒出，進(jìn)入流動相，無論打開purge鍵幾次，都無法清除不斷產(chǎn)生的氣泡。原因過濾器長期沉浸于乙酸銨等緩沖液內(nèi)，過濾器內(nèi)部由于霉菌的生長繁殖，形成菌團(tuán)，阻塞了過濾器，緩沖液難以流暢地通過過濾器，空氣在泵的壓力作用下經(jīng)過濾器進(jìn)入流動相。處理過濾器浸泡于5%硝酸溶液中，超聲清洗幾分鐘即可；亦可將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中12～36小時，輕輕震蕩幾次，再將過濾器用純水清洗幾次，打開泄壓閥，打開pu...

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蛋白質(zhì)定量實驗步驟

(1)準(zhǔn)備100~1500ug/ml的標(biāo)準(zhǔn)品,溶于Bradford法相兼容緩沖液中。對于較稀的樣品，可能通過增加樣品在試劑體積中的比率而擴(kuò)大靈敏度（microBradfordassay:1~25ug/mL)。如果樣品與染料的比值太高,可能會增加反應(yīng)混合物的PH而導(dǎo)致反應(yīng)背景較高。(2)將標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣品加人到一次性的比色皿中(應(yīng)該使用一次性的塑料比色皿或微孔板，因為染料會黏附到各種材料容器的表面上）。(3)Bradford試劑預(yù)熱至室溫。將ImL染料溶液加人到25uL蛋白質(zhì)樣...

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離子色譜-電感耦合等離子體光譜聯(lián)用檢測食品樣品中硼砂（硼酸）

采用IonPacICE-Borate離子排斥色譜柱，等度淋洗條件下即可良好保留游離態(tài)硼酸，而絡(luò)合態(tài)硼酸不干擾測定。利用電感耦合等離子光譜儀作為檢測手段則可大大增強(qiáng)檢測的選擇性，排除了食品中常見有機(jī)酸對于硼酸的干擾。但是由于離子色譜流動相的稀釋效應(yīng)，檢出靈敏度會有一定損失。

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